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lunes, 23 de junio de 2014

PRUEBA DEL LUGOL


 
1. OBJETIVO

1.1 Objetivo General:
  • Conocer la reacción del almidón con el Lugol.
1.2 Objetivos Específicos: 
  • Comprobar que la  prueba del yodo puede identificar la presencia del almidón en una muestra problema.
  • Diferenciar los cambios físicos que ocurren en las reacciones de almidón con yodo y agua.

 
2. MARCO TEÓRICO
 
2.1 Prueba del yodo
 
La prueba del yodo es una reacción química usada para determinar la presencia o alteración de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo (diyodo disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio) reacciona con almidón produciendo un color púrpura profundo.
Este tipo de prueba puede realizarse con cualquier producto que contenga almidón como ser patatas, pan o determinados frutos.
Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo presente en la solución de un reactivo llamado Lugol. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilopectina,1 el componente del almidón de cadena ramificada, forma hélices mucho más cortas, y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse, obteniéndose un color entre naranja y amarillo. Al romperse o hidrolizarse el almidón en unidades más pequeñas de carbohidrato, el color azul-negro desaparece. En consecuencia, esta prueba puede determinar el final de una hidrólisis, cuando ya no hay cambio de color constituyendo una evidencia experimental ampliamente utilizada.
La solución de yodo también reacciona con el glucógeno, aunque el color producido es más castaño y mucho menos intenso.
Esta prueba se utiliza como indicador del grado de madurez de los frutos. El fruto cuando está inmaduro contiene altas cantidades de almidón, que son detectadas a través de la tinción con la prueba de almidón, apareciendo como grandes zonas en el fruto teñidas de azul. Mientras que cuando un fruto esta maduro, ese almidón se ha transformado en azúcares y por lo tanto no se tiñe en la prueba.
 
3. PROCEDIMIENTO
Video demostrativo:
 
4. RESULTADOS REACCIONES Y DISCUSIÓN
 
4.1 Resultados
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Tabla 4.1-1: Resultado de la reacción del almidón con el Lugol.
 
Almidon
Agua
Lugol
+
-

4.2. Reacciones
 
Almidón.- La solución almidón, HCl y Lugol reacciona y toma un color azulado con partículas azules oscuras. Y el agua toma un color amarillo pálido.

4.3 Discusión
 
Este reactivo, también conocido como Lugol, solo es capaz de reaccionar con polisacáridos y su color varía con el número de ramificaciones que posea. Dicho esto es imposible que reacciones con azúcares simples, por lo que reaccionó con el almidón identificando rápidamente tornándose de color azul con tendencia violeta.
Principalmente el color final que toma el complejo se debe a la coloración azul que presenta el Lugol con la amilosa y la coloración roja con la amilopectina, por ende su coloración final estará determinada por la cantidad presente de esta subestructuras del almidón.

5. CONCLUSIONES
 
  • Se concluye que la reacción con el Lugol da positivo, y se debe a que el yodo se introduce en las espiras del almidón lo cual produce una coloración específica para cada subunidad, así para la amilosa produce una coloración azul y con la amilopectina rojo. 
  • Se comprobó que el yodo (Lugol) solo reacciona con el almidón, ya que es una prueba específica para la determinación de polisacáridos, siendo negativo ante la presencia de azúcares menores.
  • Se concluye que la solución de almidón al reaccionar con el Lugol presento un color azul-violeta, mientras que el agua solo tomo el color del reactivo. Principalmente se debe a que es específica en la determinación de polisacáridos.

6. BIBLIOGRAFÍA
—. Prueba del yodo para el almidón. Wikipedia Org. [En línea] [Citado el:17 de Mayo de 2014.]

 

REACCIÓN DE COLORACIÓN DE SELIWANOFF


1. OBJETIVO
 
1.1 Objetivo General:
  • Conocer la reacción de Seliwanoff para los azúcares.
1.2 Objetivos Específicos:
  • Verificar si el reactivo de Seliwanoff identifica cetosas usando en la práctica azúcares como: glucosa, sacarosa, fructosa y maltosa.
  • Identificar  los cambios físicos que ocurren en las diferentes reacciones; de reactivo de Seliwanoff con soluciones de glucosa, sacarosa, fructosa, maltosa.
2. MARCO TEÓRICO
 
2.1 Prueba de Seliwanoff
 
La prueba de Seliwanoff es una prueba química que se usa para distinguir entre aldosas y cetosas. Los azúcares son distinguidos a través de su función como cetona o aldehído. Si el azúcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas.
El reactivo consiste en resorcinol y ácido clorhídrico concentrado:
La hidrólisis ácida de polisacáridos y oligosacáridos nos da azúcares simples.
Entonces la cetosa deshidratada reacciona con el resorcinol para producir un color rojo. Es posible que las aldosas reaccionen produciendo un leve color rosa.
La fructosa da positiva a esta prueba. La sacarosa da negativa a esta prueba ya que la molécula, si bien está constituida por glucosa y fructosa, en la unión alfa (1-2) se anulan las propiedades reductoras de la glucosa y la fructosa, por lo que no da positiva, la sacarosa da positiva cuando se le realiza una hidrólisis ácida, lo que la convierte en un azúcar invertido o invertasa, donde se rompe el enlace alfa (1-2) y permite que la reacción con esta prueba dé positivo.
 
3. PROCEDIMIENTO
Video demostrativo:
 
 
4. RESULTADOS REACCIONES Y DISCUSIÓN
 
4.1 Resultados
 
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Tabla 4.1-1: Resultados de las reacción de los azúcares y el reactivo de Seliwanoff.
 
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Maltosa
Seliwanoff
-
+
-
-
 
4.2 . Reacciones
 
Glucosa.- No reacciona con el reactivo de Seliwanoff.
Fructosa.- Luego de calentar se presenta un color rojizo.
Sacarosa.- No reacciona con el reactivo de Seliwanoff.
Maltosa.- No reacciona con el reactivo de Seliwanoff.
 
4.3 Discusión  
 
En esta reacción el único azúcar que reaccionó fue la fructosa, confirmando así que este tipo de reactivo es capaz de identificar solo cetosas.
Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas.
La sacarosa presentó una variación de color de muy baja debido a que esta formada por  glucosa y fructosa por lo tanto tiene un bajo carácter de azúcar cetosa en su estructura.
 
5. CONCLUSIONES
  • Se realizó la reacción de Seliwanoff con las diferentes soluciones de azúcares, obteniéndose resultados visuales de cambio de color, evidenciando si es cetosa al cambio de color a rojo. 
  • Se logró comprobar que el reactivo de seliwanoff si identifica cetosas, puesto que ha dado resultado positivo con la solución de fructosa, la cual es un azúcar que pertenece a la familia de las cetosas; las demás no produjeron cambios, por lo tanto se concluye que son aldosas.
  • Se identificó que la fructosa adoptó un color rojo intenso al reaccionar con el reactivo de Seliwanoff, los demás azúcares dieron negativo debido a que este reactivo identifica sólo cetosas.
 
6. BIBLIOGRAFÍA
—. Reactivo de Seliwanoff. Wikipedia Org. [En línea] [Citado el: 7 de Mayo de 2014.]

REACCIÓN DE COLORACIÓN DE MOLISH


1. OBJETIVO
 
1.1 Objetivo General:
  • Conocer la reacción de Molish para la glucosa.
1.2 Objetivos Específicos:
  • Observar si el reactivo de Molish identifica carbohidratos usando una solución de glucosa.
  • Identificar  los cambios físicos visuales que ocurren en la reacción, con la solución de glucosa.
 
2. MARCO TEÓRICO
 
2.1 Reacción de Molisch
 
La reacción de Molisch es una reacción que tiñe cualquier carbohidrato presente en una disolución. Se utiliza como reactivo una solución de α-naftol al 5% en etanol de 96º. En un tubo de ensayo a temperatura ambiente, se deposita la solución problema y un poco del reactivo de Molisch. A continuación, se le añade ácido sulfúrico e inmediatamente aparece un anillo violeta que separa al ácido sulfúrico, debajo del anillo, de la solución acuosa en caso positivo.
Es una reacción cualitativa, por lo que no permite saber la cantidad de glúcidos en la solución original.
 
3. PROCEDIMIENTO
 
Video demostrativo:
 
 4. RESULTADOS REACCIONES Y DISCUSIÓN
 
4.1 Resultados
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 Tabla 4.1-1: Resultados de la reacción de los azúcares con el reactivo de Molisch.
 
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Maltosa
Molisch
+
+
+
+
 
4.2. Reacciones
Glucosa.- El cambio observado en la mezcla de glucosa  con Molisch presentó dos fases y en la interface se formó un anillo violeta. Además hubo una reacción exotérmica.
Esta reacción se produce con todos los azúcares en cuestión.
 
4.3 Discusión
 
En esta reacción con la glucosa, se produjo un anillo de color violeta; debido a que Molish es una reacción de identificación de carbohidratos.
Todos los glúcidos por acción del ácido sulfúrico concentrado se deshidratan formando compuestos furfúricos (las pentosas dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos compuestos furfúricos reaccionan positivamente con el reactivo de Molish (solución alcohólica de alfa-naftol).
 
5. CONCLUSIONES
  • Se realizó la reacción de Molish con la glucosa obteniéndose un resultado característico que será el mismo para otras soluciones de azúcares.
  • Se concluye que el reactivo de Molish si identifica carbohidratos, ya que si reacciono con la glucosa que es ejemplo de  un carbohidrato.
  • Se observó; que la reacción de Molish da positivo con la glucosa, la cual separa en dos fases la muestra dando lugar a la formación de un anillo violeta en la interfase.
 
6. BIBLIOGRAFÍA
—.Reacción de Molish. Wikipedia Org. [En línea] [Citado el: 17 de Mayo de 2014.]
 
 

REACCION DE OXIDACION DE BARFOED


1. OBJETIVOS
 
1.1 Objetivo General:
  • Conocer la reacción de Barfoed con las soluciones de azúcares.
1.2 Objetivos Específicos:
  • Comprobar si el reactivo de Barfoed es capaz de diferenciar entre monosacáridos y disacáridos, realizando la prueba en las soluciones de maltosa y glucosa. 
  • Identificar  los cambios físicos que ocurren en la reacción de Barfoed , en las soluciones de glucosa y maltosa.
2. MARCO TEÓRICO
2.1 Prueba de Barfoed
La Prueba de Barfoed es un ensayo químico utilizado para detectar monosacáridos. Se basa en la reducción de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.
 
RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH + Cu2O↓ + 4H+
 
Los disacáridos también pueden reaccionar, pero en forma más lenta. El grupo aldehído del monosacárido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio, pueden interferir en la prueba.

3. PROCEDIMIENTO

Video demostrativo:
 

4. RESULTADOS REACCIONES Y DISCUSIÓN

4.1 Resultados


 

 Tabla 4.1-1: Reacción de los azucares con el reactivo de Barfoed.

 
Glucosa
Maltosa
Barfoed
Reacciona rápidamente en los primeros 5 min.
Reacciona lentamente, después de 6 min.

 
4.2 Reacciones
 
RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH + Cu2O↓ + 4H+
Glucosa.- La solución de glucosa con el reactivo de Barfoed luego se someterla al calor y dejarla al reposo forma un precipitado rojo de óxido cuproso de manera rápida.
Maltosa.- La solución de maltosa con el reactivo de Barfoed luego se someterla al calor y dejarla al reposo forma un precipitado rojo de óxido cuproso de manera lenta.
 
4.3 Discusión
 
Los resultados de la prueba de Barfoed dieron positivos para la glucosa como monosacárido y para la maltosa como disacárido.
La reacción con la glucosa se dio en un periodo de tiempo menor a los 5 minutos, mientras que la maltosa produjo un cambio pasados los 5 minutos.
 
5. CONCLUSIONES
  • Se realizó la reacción de Barfoed con la glucosa y maltosa, los resultados obtenidos fueron diferentes entre estos dos azúcares debido a la naturaleza de cada azúcar, puesto que la glucosa es un monosacárido y la maltosa es un disacárido.
  • Se concluye que el reactivo de Barfoed no solo identifica azúcares monosacáridos sino que también ayuda a diferenciar entre monosacáridos o disacáridos, la glucosa que es un monosacárido reaccionó rápidamente, y la maltosa es un disacárido  ya que tuvimos que esperar más de 5 minutos para empezar a observar la formación del precipitado. 
  • Se identificó que la reacción entre el reactivo de Barfoed y los azúcares: maltosa y glucosa; fue de oxidación provocando un precipitado de color rojo que es del óxido cuproso que se formó.
 
6. BIBLIOGRAFÍA
—. Prueba de Barfoed. Wikipedia Org. [En línea] [Citado el: 7 de Mayo de 2014.]
 http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_de_Barfoed.

domingo, 22 de junio de 2014

REACCION DE OXIDACION DE FEHLING


1. OBJETIVO

 
1.1 Objetivo General:
  • Conocer la reacción de Fehling para los azúcares.
 
1.2 Objetivos Específicos:
  • Comprobar si el reactivo de Fehling identifica azúcares reductores, realizando la prueba en soluciones de azúcares como: glucosa, sacarosa, fructosa y maltosa.
  • Identificar los cambios físicos que acontecen durante la reacción de Fehling, en las siguientes soluciones: glucosa, sacarosa, fructosa y maltosa.
 
2. MARCO TEÓRICO
 
2.1 Azúcares
 
Se denomina técnicamente azúcares a los glúcidos que generalmente tienen sabor dulce, como son los diferentes monosacáridos, disacáridos y oligosacáridos, aunque a veces se usa incorrectamente para referirse a todos los carbohidratos.
En cambio, se denomina coloquialmente azúcar a la sacarosa, también llamado azúcar común o azúcar de mesa. La sacarosa es un disacárido formado por una molécula de glucosa y una de fructosa, que se obtiene principalmente de la caña de azúcar o de la remolacha azucarera.
Los azúcares son elementos primordiales, y están compuestos solamente por carbono, oxígeno e hidrógeno.
Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas.
Todos los monosacáridos son azúcares reductores, ya que al menos tienen un -OH hemiacetálico libre, por lo que dan positivo a la reacción con reactivo de Fehling, a la reacción con reactivo de Tollens, a la Reacción de Maillard y la Reacción de Benedict. Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan equilibrio con la forma abierta, presentan mutarrotación (cambio espontáneo entre las dos formas cicladas α (alfa) y β (beta)), o decir que forma osazonas.
Los azúcares reductores provocan la alteración de las proteínas mediante la reacción de glucosilación no enzimática también denominada reacción de Maillard o glicación.
La glucosa es el azúcar reductor más abundante en el organismo. Su concentración en la sangre está sometida a un cuidadoso mecanismo de regulación en individuos sanos y, en personas que padecen diabetes, aumenta sustancialmente. Esto lleva a que éste sea el azúcar reductor generalmente considerado en las reacciones de glucosilación no enzimática de interés biológico. Sin embargo, cualquier azúcar que posea un grupo carbonilo libre puede reaccionar con los grupos amino primarios de las as para formar bases de Schiff.
La reactividad de los distintos azúcares está dada por la disponibilidad de su grupo carbonilo. Se sabe que la forma abierta o extendida de los azúcares no es muy estable, a tal punto que, por ejemplo, en la glucosa representa sólo el 0,002 %. Las moléculas de azúcar consiguen estabilizarse a través de un equilibrio entre dicha forma abierta y por lo menos dos formas cerradas (anómeros cíclicos) en las que el grupo carbonilo ha desaparecido.
 
2.2 Reactivo de Fehling
El reactivo de Fehling, es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de reductores. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:
Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solución de hidróxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido de cobre (II).
El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído. Éste se oxida a un ácido carboxílico y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a óxido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reacción es que la forma aldehído puede detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar reduce el licor de Fehling a óxido de cobre (I) rojo, se dice que es un azúcar reductor.
Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehído dando lugar a un falso positivo.
 
3. PROCEDIMIENTO
Video demostrativo:

4. RESULTADOS  REACCIONES Y DISCUSIÓN
 
4.1 Resultados

 
 

Tabla 4.1-1: Resultado de la reacción de los azúcares ante el reactivo de Fehling.


 
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Maltosa
Fehling
+
+
-
+

4.2 Reacciones
 
Glucosa.- La mezcla de solución glucosa con reactivo Fehling, al someterla al calor aparece un precipitado anaranjado rojo propio del  óxido cuproso.
Fructosa.- Al mezclar solución de fructosa con Fehling y someterla al calor se produce un precipitado de óxido cuproso color anaranjado rojo.
Sacarosa.- La mezcla de solución de sacarosa y reactivo de Fehling no reacciona al someterlo al calor, mantiene el color azul del reactivo.
Maltosa.- La mezcla de solución maltosa y Fehling al someterlo al calor produce un precipitado de óxido cuproso de color anaranjado rojo.
 
4.3 Discusión
Dentro de los resultados obtenidos en la diferentes reacciones de los azúcares con el reactivo de Fehling se obtuvieron resultados positivos en la identificacion de azucares reductores para la glucosa, fructosa y maltosa, debido al carbonilo libre presente en ellos; por otro lado la sacarosa no es un azúcar reductor.
La reacción del Reactivo de Fehling ante la presencia de un azúcar reductor produce un precipitado de color rojo ladrillo, característico del oxido cuproso.
 
5. CONCLUSIONES

  • La reacción de Fehling es un tipo de prueba usada para identificar azúcares reductores, la cual se fundamenta en el carácter reductor del grupo carbonilo presente en el grupo funcional aldehído.
  • Se comprobó que el reactivo de Fehling si identifica azúcares reductores, ya que dio positivo el resultado con las soluciones de glucosa, fructosa  y maltosa debido q que éstas tienen  un carbonilo libre el cual permite la mutarrotación. 
  • Se identificó que la reacción entre el reactivo de Fehling y los azúcares maltosa, glucosa  y fructosa, fue de oxidación provocando un precipitado de color rojo ladrillo que es propio del óxido cuproso que se formó y con la sacarosa no tuvo ningún resultado físico visible debido que este es un azúcar no reductor.
 
6. BIBLIOGRAFÍA
—. Azúcares Reductores
Wikipedia Org. [Citado el: 16 de Mayo de 2014.]
—. Reactivo de Fehling.
Wikipedia Org. [En línea] [Citado el: 7 de Mayo de 2014.]